詳細資料：

NEST 801009 爬片 6孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包

上海點睿儀器儀表有限公司一家專注于生命科學領域的產(chǎn)品渠道商和技術服務商。公司由幾位海外留學多年的回國人員，于2011年3月創(chuàng)立，2013年銷售額突破2000萬元。公司致力于向客戶提供*的產(chǎn)品、*化的解決方案和高品質的專業(yè)服務，并承擔起生物科學產(chǎn)業(yè)助推器的歷史使命，服務并推動生命科學事業(yè)的發(fā)展。優(yōu)秀的員工、科學的管理、高效的營運、全面的信息網(wǎng)絡、雄厚的資金、多年的行業(yè)經(jīng)驗和進步的經(jīng)營理念，是我們服務于客戶、奉獻于社會、實現(xiàn)歷史使命的基礎和保證。

公司價值觀——成就客戶、創(chuàng)新為要、誠信負責

公司自主研發(fā)了程序降溫盒，不銹鋼試管架，太空鋁制架，在市場中得到了熱捧！客戶反饋特別好！

公司同時也是生產(chǎn)了恒溫金屬加熱器，金屬浴，性價高！

常規(guī)類耗材代理了，CKSLAB ,NEST，巴羅克，axygen,corning,nunc,nalgene,等等。

NEST 801009 爬片 6孔 適用于細胞培養(yǎng)板 100個/包

商品名稱：爬片

商品貨號：801009

品牌：耐思  NEST

規(guī)格：100個/包

一、爬片的準備

        1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片；本公司*的爬片不防一試，適合多種細胞的爬片。

        2.應用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。 如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色。

        3.將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并guoye，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時，再用三蒸水沖洗3遍（個人認為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了，如果不干凈的話，細胞帖壁不好），放在飯盒或者玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進行高壓消毒。

        4.高壓后取出放入烤箱中烤干，備用?？靖珊罂煞湃氤瑑襞_中。

        5.關于多聚賴氨酸，很多人都將玻片用此處理，以使細胞與玻片結合更牢。但我在做爬片時從來沒用過多聚賴氨酸，細胞貼壁仍然很好，且在做后續(xù)的免疫細胞化學染色、TUNEL等凋亡檢測、免疫熒光等也從未脫過片。

  二、細胞爬片

        1.胰酶消化細胞后計數(shù)重懸細胞于*培養(yǎng)基中。

        2.加細胞時，根據(jù)玻片的大小，先在每個孔里準備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基，目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起，然后放玻片，防止加細胞懸液時玻片漂起，造成雙層細胞貼片。整個過程注意無菌操作。

        3.根據(jù)自己的需要選擇合適的細胞密度種入培養(yǎng)板內即可

        4.待細胞貼壁后，可去上清加含藥培養(yǎng)基。

        5.按照實驗設計，作用一定時間后取玻片。取玻片時由于玻片與培養(yǎng)皿底結合較緊，張力較大，我一般將注射器針頭針尖向背面弄個小鉤，這樣將爬片輕輕勾起，用小鑷子取出就可以了。如果要做諸如24h，48h，72h等這樣時間點的實驗的話，將所需數(shù)量的爬片取出時應用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng)。

 三、細胞爬片的固定

          細胞爬片取出后，一般用PBS洗2遍，然后再做固定。當然，根據(jù)研究目的，PBS洗也不是一定要做的，比如做凋亡的TUNEL染色時就避免洗，因為凋亡的細胞在洗的過程中有可能會脫落。

         另外在保存細胞爬片的時候，我一般用培養(yǎng)皿或板，先在皿底放一層面巾紙，然后再放爬片，這樣方便做實驗時取片。然后蓋上蓋子，并在蓋子上做標記，為避免混淆，可用透明膠帶將蓋子和皿連在一起。一般-20℃保存2-3個月的片子做免疫組化是沒有問題的。